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杆状病毒包装及蛋白表达技术服务

杆状病毒/昆虫细胞蛋白表达系统因其稳定性、安全性、翻译后修饰水平高及蛋白活性高等优势,广泛应用于生物、医药等行业。杆粒生物自主研发的qBac®系列Bacmid是目前全球领先的杆状病毒/昆虫细胞表达系统,能够高水平表达高活性的重组蛋白,在蛋白表达、酶制剂、疫苗及基因治疗等行业具有丰富的经验,可为科研客户及工业客户提供高水平的病毒包装及蛋白表达服务。

杆粒生物优势

  1. 成功率高:杆粒生物的qBac®杆状病毒表达系统目前没有失败案例。
  2. 蛋白产量高:杆粒生物qBac®的应用实践中,50%的重组蛋白产量高于300mg/L。
  3. 模块化方案:杆粒生物qBac®系统中,针对表达策略(胞内、分泌、表面展示)、信号肽选择、亲和标签选择等方面,均有成熟的模块化设计方案,最大程度实现重组蛋白的高表达量和高活性。
  4. 知识产权清晰:杆粒生物的qBac®杆状病毒表达系统具有完全的自主知识产权,保障后期商业授权顺利无忧。
  5. 专业服务:杆粒生物专注于杆状病毒/昆虫细胞蛋白表达系统的研发和应用,为客户提供全程技术咨询和支持。

技术服务内容详情

qBac® Bacmid采用同源重组方式获得重组病毒,过程简便,优于目前广泛使用的Bac-to-bac系统(扩展阅读:从Bac-to-Bac转移到qBac®)。qBac® Bacmid获得带有外源基因的重组病毒的程序如下图所示:

MCS Your gene Linearized Bacmid Gene cloning Co-transfection Insect cell Homologous recombination in vivo Scale-Up ofRecombinant Virus Transfervector Day 0 Harvest recombinant virus Day 4~6 Protein Expression

技术服务可包含内容
步骤 详情 周期 交付标准
1、基因合成 对目的基因进行基因合成
利用自行开发的算法进行稀有密码子优化
1~2周 合成好的基因
基因合成报告
2、重组转移载体构建 将目的基因亚克隆至穿梭载体中
可提供的转移载体类型有:胞内表达型、分泌表达型、表面展示型
1周 重组载体
载体构建报告
3、病毒包装 qBac®杆粒和转移载体共转染昆虫细胞
P0代病毒悬液(低滴度),P1代及P2代病毒悬液(高滴度)
2~3周 病毒悬液
病毒包装报告
4、病毒滴度测定 基于极限稀释法的重组病毒滴度测定(荧光标记的病毒)
基于流式细胞术的重组病毒滴度测定
基于实时定量PCR法的重组病毒滴度测定
1周 病毒滴度测定报告
5、蛋白表达检测 P2代病毒感染昆虫细胞(Sf9细胞和HighFive细胞)
SDS-PAGE和Western blot检测蛋白表达
1周 蛋白表达检测报告
6、蛋白纯化测试 P2代病毒感染200mL悬浮昆虫细胞
Ni柱一步亲和纯化
SDS-PAGE和Western blot检测纯化蛋白
2~3周 纯化的蛋白
蛋白纯化报告
7、纯化蛋白制备 1-10L悬浮昆虫细胞用于蛋白制备
Ni柱一步亲和纯化
蛋白buffer置换浓缩
SDS-PAGE和Western blot检测纯化蛋白
2~3周 纯化的蛋白
蛋白纯化报告

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