杆状病毒包装及蛋白表达技术服务
杆状病毒/昆虫细胞蛋白表达系统因其稳定性、安全性、翻译后修饰水平高及蛋白活性高等优势,广泛应用于生物、医药等行业。杆粒生物自主研发的qBac®系列Bacmid是目前全球领先的杆状病毒/昆虫细胞表达系统,能够高水平表达高活性的重组蛋白,在蛋白表达、酶制剂、疫苗及基因治疗等行业具有丰富的经验,可为科研客户及工业客户提供高水平的病毒包装及蛋白表达服务。
杆粒生物优势
- 成功率高:杆粒生物的qBac®杆状病毒表达系统目前没有失败案例。
- 蛋白产量高:杆粒生物qBac®的应用实践中,50%的重组蛋白产量高于300mg/L。
- 模块化方案:杆粒生物qBac®系统中,针对表达策略(胞内、分泌、表面展示)、信号肽选择、亲和标签选择等方面,均有成熟的模块化设计方案,最大程度实现重组蛋白的高表达量和高活性。
- 知识产权清晰:杆粒生物的qBac®杆状病毒表达系统具有完全的自主知识产权,保障后期商业授权顺利无忧。
- 专业服务:杆粒生物专注于杆状病毒/昆虫细胞蛋白表达系统的研发和应用,为客户提供全程技术咨询和支持。
技术服务内容详情
qBac® Bacmid采用同源重组方式获得重组病毒,过程简便,优于目前广泛使用的Bac-to-bac系统(扩展阅读:从Bac-to-Bac转移到qBac®)。qBac® Bacmid获得带有外源基因的重组病毒的程序如下图所示:
步骤 | 详情 | 周期 | 交付标准 |
1、基因合成 | 对目的基因进行基因合成 利用自行开发的算法进行稀有密码子优化 |
1~2周 | 合成好的基因 基因合成报告 |
2、重组转移载体构建 | 将目的基因亚克隆至穿梭载体中 可提供的转移载体类型有:胞内表达型、分泌表达型、表面展示型 |
1周 | 重组载体 载体构建报告 |
3、病毒包装 | qBac®杆粒和转移载体共转染昆虫细胞 P0代病毒悬液(低滴度),P1代及P2代病毒悬液(高滴度) |
2~3周 | 病毒悬液 病毒包装报告 |
4、病毒滴度测定 | 基于极限稀释法的重组病毒滴度测定(荧光标记的病毒) 基于流式细胞术的重组病毒滴度测定 基于实时定量PCR法的重组病毒滴度测定 |
1周 | 病毒滴度测定报告 |
5、蛋白表达检测 | P2代病毒感染昆虫细胞(Sf9细胞和HighFive细胞) SDS-PAGE和Western blot检测蛋白表达 |
1周 | 蛋白表达检测报告 |
6、蛋白纯化测试 | P2代病毒感染200mL悬浮昆虫细胞 Ni柱一步亲和纯化 SDS-PAGE和Western blot检测纯化蛋白 |
2~3周 | 纯化的蛋白 蛋白纯化报告 |
7、纯化蛋白制备 | 1-10L悬浮昆虫细胞用于蛋白制备 Ni柱一步亲和纯化 蛋白buffer置换浓缩 SDS-PAGE和Western blot检测纯化蛋白 |
2~3周 | 纯化的蛋白 蛋白纯化报告 |
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