qBac®系列杆状病毒表达载体
| 名称 | 简要特性 |
| qBac-I | Bacmid基本型，适合一般要求的蛋白质表达。 |
| qBac-II | 适合分泌蛋白的表达。已下架。 |
| qBac-III | 广谱抗凋亡Bacmid，产量非常高，适合胞内及分泌蛋白表达。 |
| qBac-IIIG | 广谱抗凋亡Bacmid，产量比qBac-III高，适合胞内及分泌蛋白表达，有可视化荧光标记。 |
qBac-I
Bacmid基本型，部分敲除了必需基因ORF1629，通过同源重组即可获得100%阳性重组病毒。适用于实验室一般性表达蛋白、研究杆状病毒基因功能等。
| 规格：5 Reaction Kit/盒 | 货号：10101 | |||
|---|---|---|---|---|
| 数量（盒） | 1 | 2-3 | 4-9 | ≥10 |
| 单价（元/盒） | 2500 | 2250 | 2000 | 1750 |
文献：Zhao Y, Chapman DA, & Jones IM. 2003. Improving baculovirus recombination. Nucleic acids research, 31(2), e6-6. https://doi.org/10.1093/nar/gng006
qBac-II
在qBac-I基础上筛选到的cathepsin缺失的毒株，用该载体表达的外源蛋白产量有显著提升，该载体尤其适用于分泌蛋白、膜蛋白和病毒样颗粒（VLP）的表达。
该产品已下架。
qBac-III
在qBac-II基础上进行了抗凋亡改造，将靶向昆虫Caspase-1的小RNA序列敲入p10位点，使病毒感染的Sf细胞（Sf9、Sf21...）和Tn细胞（High Five）抗凋亡，从而大幅度提高外源蛋白的产量。
| 规格：5 Reaction Kit/盒 | 货号：10301 | |||
|---|---|---|---|---|
| 数量（盒） | 1 | 2-3 | 4-9 | ≥10 |
| 单价（元/盒） | 5000 | 4500 | 4000 | 3500 |
宿主凋亡是对抗病毒感染的策略之一。宿主在病毒感染后迅速启动细胞的凋亡通道，经过多级信号放大，最终使细胞凋亡，从而抑制了病毒的复制和扩散。我们针对昆虫细胞凋亡通路的第一个效应蛋白Caspase-1设计了一段双链小RNA，并把这段小RNA克隆到Bacmid上。当病毒进入宿主细胞后，小RNA通过宿主RNA聚合酶III转录，再通过宿主Dicer等酶的加工和装配，形成靶向宿主Caspase-1的siRNA，进而介导Caspase-1 mRNA的降解，最终导致宿主凋亡通路被阻断。宿主凋亡被抑制后，病毒表达的外源蛋白产量会显著提高。
我们设计的小RNA可以同时靶向Sf（如Sf9、Sf21）和Tn（如High Five）两种工业上常用的昆虫细胞系。
qBac-III与对照载体蛋白产量对比（考染）
Ctrl是不编码小RNA的Bacmid，其他遗传背景与qBac-III完全一致。白色箭头指示的是外源蛋白FluC。
qBac-IIII与对照载体蛋白活性对比
Ctrl是不编码小RNA的Bacmid，其他遗传背景与qBac-III完全一致。
从上图可以看出，qBac-III不仅仅提高了蛋白的产量，其生物学活性也同步提高，说明抗凋亡使细胞内蛋白质量控制系统持续工作。
专利：一种广谱抗凋亡杆状病毒表达载体（ZL201810640684.X）
文献：Zhang, X., Zhao, K., Lan, L., Shi, N., Nan, H., Shi, Y., Xu, X., & Chen, H. (2021). Improvement of protein production by engineering a novel antiapoptotic baculovirus vector to suppress the expression of Sf‐caspase‐1 and Tn‐caspase‐1. Biotechnology and Bioengineering, 1–13. https://doi.org/10.1002/bit.27807
qBac-IIIG 推荐产品
qBac-IIIG是qBac-III的绿色荧光版。我们将绿色荧光蛋白基因（GFP）敲入qBac-III染色体中，GFP基因由病毒的中等强度启动子控制，能直观看到是否产生重组病毒，并方便测定滴度。如果GFP的存在不影响后续工作，建议您选择使用qBac-IIIG。由于GFP插入位点敲除了两个病毒非必需基因，其产量高于qBac-III（提高约60%）。
| 规格：5 Reaction Kit/盒 | 货号：10302 | |||
|---|---|---|---|---|
| 数量（盒） | 1 | 2-3 | 4-9 | ≥10 |
| 单价（元/盒） | 5000 | 4500 | 4000 | 3500 |
转染后不同时间出现荧光的细胞
最早可以在转染后36小时观察到微弱的绿色荧光
qBac-IIIG重组病毒绿色荧光（左）与p10启动子表达的GFP荧光（右）强度对比
这个荧光强度既可以保证在荧光显微镜下观测到，又不会与晚期启动子竞争胞内资源
qBac-IIIG与qBac-III表达量对比
在High Five细胞中表达荧光素酶（FluC），感染后第四天收集细胞。黑色箭头指示的是FluC。通过图像密度扫描定量，qBac-IIIG的产量比qBac-III提高了60%。
专利：一种广谱抗凋亡杆状病毒表达载体（ZL201810640684.X）
专利：一种高产杆状病毒表达载体（ZL201811607414.5）
文献：Zhang, X., He, A., Zong, Y., Tian, H., Zhang, Z., Zhao, K., Xu, X., & Chen, H. (2023). Improvement of protein production in baculovirus expression vector system by removing a total of 10 kb of nonessential fragments from Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus genome. Frontiers in microbiology, 14, 1171500. https://doi.org/10.3389/fmicb.2023.1171500
陕公网安备61909002000114号
