从Bac-to-Bac转移到qBac®

Bac-to-Bac系统创建于1993年，是目前使用最广泛的杆状病毒表达系统。作为经典的重组杆状病毒构建手段，Bac-to-Bac系统精巧而复杂（见下图）。

我们经常会收到客户的询问，qBac^®系统与Bac-to-Bac系统有何区别，如何从现有的Bac-to-Bac平台转移到qBac^®平台。

事实上，杆状病毒表达系统可以根据引进外源基因片段的方式分为两个截然不同的体系：

1、转座方式：在大肠杆菌中通过转座子转座，将外源基因转座到Bacmid上，再用筛选到的Bacmid转染昆虫细胞，获得重组病毒。采取这个方式的主要是ThermoFisher的Bac-to-Bac系统。

2、重组方式：将带有同源臂的外源基因（外源基因克隆在特定质粒上）与Bacmid共转染昆虫细胞，在昆虫细胞内完成同源重组，获得重组病毒。采取这个方式的有我公司的qBac、OET的FlashBac、Novagen的BacMagic和Clontech的BacPAK。

其中，采取重组方式的系统都是互相兼容的，既这些公司之间的转移质粒是通用的。

那么，如何从Bac-to-Bac转移到qBac^®呢？请先看看下表中的对比：

从上表可以看出，只需要将基因片段克隆pQB^®系列或兼容质粒上，即可完成平台的转移。

• 从Bac-to-bac转移到qBac^®的优点：
  • 实验步骤大幅度简化。实验失败，容易找出问题所在
  • 不需要提取Bacmid。Bacmid本身很大，操作不小心就会造成断裂，严重影响转染
  • 无抗性基因残留
  • 最主要的，您可以享受到我们的高产杆状病毒表达系统带来的益处
• 从Bac-to-bac转移到qBac^®的缺点：
  • 由于需要在昆虫细胞中重组，所以获得第一代病毒的滴度稍低于Bac-to-Bac
  • qBac^® Bacmid是不可复制的，所以您必须要购买我们的Bacmid