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《Development and Application of a Fully Automated Chemiluminescence Enzyme Immunoassay for the Detection of Antibodies Against Porcine Circovirus 3 Cap》(DOI:10.3390/v16121925.)建立了一种全自动的化学发光免疫分析方法,用于检测猪圆环病毒PCV3 Cap蛋白抗体。

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猪圆环病毒3型(PCV3)是一种与猪皮炎和肾病综合征(PDNS)相关的小型无包膜圆环病毒。它已在世界范围内发生,并对养猪业构成严重威胁。然而,目前还没有商业化的疫苗。PCV3衣壳蛋白(Cap)是血清学诊断的理想候选抗原。本文建立了一种新的全自动化学发光酶免疫分析方法,用于检测猪血清中Cap抗体。

首先使用陕西杆粒生物科技有限公司的qBac®杆状病毒/昆虫细胞蛋白表达系统包装杆状病毒并产生自组装成病毒样颗粒(VLPs)的重组PCV3 Cap,再将其偶联到作为载体的磁性颗粒(Cap-MPs)上。结合碱性磷酸酶(AP)-金刚烷(AMPPD)系统,Cap-Abs可以在全自动化学发光分析仪上快速测定。在最佳条件下,确定的临界值为31508,诊断灵敏度为96.8%,特异性为97.3%。与PCV1和PCV2以及其他常见的猪病原体没有观察到交叉反应,测定内和测定间的系数分别小于5%和10%。制备的Cap-MPs可在4℃下储存6个月以上。重要的是,这种CLEIA与市售试剂盒的符合率高达95.19%,显示出卓越的分析灵敏度,并显著减少了操作时间和人力。

相比传统的ELISA检测方法,建立的新方法,更加灵敏、高效,操作更简单,结果线性范围更宽,适用于Cap蛋白抗体评价。最后,我们借助新方法对PCV3血清学进行调查,发现PCV3在猪群中广泛感染,应值得重视。

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